<> "The repository administrator has not yet configured an RDF license."^^ . <> . . "Fluoreszenzmikroskopische Untersuchung zum retroviralen Eintritt auf Einzelpartikelebene"^^ . "HIV-1 ist in den letzten drei Jahrzehnten im Fokus intensiver Forschung gewesen. Trotzdem sind die frühen Schritte des Zelleintritts noch nicht im Detail verstanden. Die Fusion und die direkt nachfolgenden Schritte der Virusinfektion sind mit den herkömmlichen biochemischen und virologischen Ensemblemessungen nur auf Kosten der Zeitauflösung und durch die Verwendung artifizieller Synchronisationsmethoden zu adressieren. In dieser Arbeit wird die virale Fusion mittels live cell imaging auf Einzelpartikelebene untersucht. Dazu war die Etablierung eines auf Fluoreszenzsignalen beruhenden Indikators für Fusion nötig. Um dies zu erreichen wurden bereits vor dieser Arbeit an inneren Partikelstrukturen fluoreszenzmarkierte HIV-Partikel mit einer zusätzlichen Fluoreszenzmarkierung in der Virusmembran versehen. Die Membranmarkierung sollte im Moment der Membranfusion an der zellulären Membran verbleiben und sich so von der ersten Fluoreszenzmarkierung trennen. Als effektive membranmarkierungsmethode stellte sich die Pseudotypisierung der HIV-Partikel mit MLV.Env.YFP heraus. Gegenüber dem HIV-Hüllprotein besitzt das MLV-Hüllprotein eine hohe Fusogenität, was für die Detektion von Fusionen einzelner Partikel ein Vorteil ist. Um die Detektionswahrscheinlichkeit einzelner Fusionsereignisse weiter zu erhöhen, wurde ein neuer Versuchsaufbau in der Abteilung etabliert. Das gewählte Verfahren erlaubte die einfache Quantifizierung der Virus-Zell-Interaktionen. Nach ausführlicher Charakterisierung wurden mittels eines automatisierten Virustracking-Algorithmus mehr als 20.000 einzelne Partikel verfolgt und 28 Fusionen auf Einzelpartikelebene als Farbtrennungsereignisse detektiert. Um die frühen Ereignisse der Infektion besser zu verstehen, wurden die inneren Partikelstrukturen über unterschiedliche fluoreszenzmarkierte HIV-Proteine visualisiert. Das Verhalten der fluoreszenzmarkierten Proteine nach der Fusion wurde miteinander verglichen. Es zeigte sich, dass Viren mit dem MLV-Hüllprotein effizient an der Plasmamembran fusionierten. Außerdem blieb das fluoreszenzmarkierte Matrix-Protein, von dem bislang angenommen wurde, dass es sich nach der Fusion schnell im Zytosol auflöst, über längere Zeit als punktierte Struktur sichtbar. In unserem experimentellen System kann die Trennung der Matrix vom Viruskern auch erst Minuten nach der Fusion erfolgen."^^ . "2010" . . . . . . . . "Peter"^^ . "Koch"^^ . "Peter Koch"^^ . . . . . . "Fluoreszenzmikroskopische Untersuchung zum retroviralen Eintritt auf Einzelpartikelebene (PDF)"^^ . . . "Mai_Komplett3.pdf"^^ . . . "Fluoreszenzmikroskopische Untersuchung zum retroviralen Eintritt auf Einzelpartikelebene (Other)"^^ . . . . . . "indexcodes.txt"^^ . . . "Fluoreszenzmikroskopische Untersuchung zum retroviralen Eintritt auf Einzelpartikelebene (Other)"^^ . . . . . . "lightbox.jpg"^^ . . . "Fluoreszenzmikroskopische Untersuchung zum retroviralen Eintritt auf Einzelpartikelebene (Other)"^^ . . . . . . "preview.jpg"^^ . . . "Fluoreszenzmikroskopische Untersuchung zum retroviralen Eintritt auf Einzelpartikelebene (Other)"^^ . . . . . . "medium.jpg"^^ . . . "Fluoreszenzmikroskopische Untersuchung zum retroviralen Eintritt auf Einzelpartikelebene (Other)"^^ . . . . . . "small.jpg"^^ . . "HTML Summary of #10927 \n\nFluoreszenzmikroskopische Untersuchung zum retroviralen Eintritt auf Einzelpartikelebene\n\n" . "text/html" . . . "570 Biowissenschaften, Biologie"@de . "570 Life sciences"@en . .