title: Stressabhängige Ribonukleoproteinkomplex Formation in der Kontrolle der Prothrombin Genexpression
creator: Gantzert, Anne-Susan
subject: 570
subject: 570 Life sciences
description: Die 3´Endprozessierung ist neben dem Capping und Spleißen ein wichtiger posttrans-kriptioneller Genexpressionsmechanismus. Die Prothrombin (F2) mRNA ist ein Prototyp für eine Genfamilie, die ein ungewöhnliches RNA Sequenz Motiv in der 3´ untranslatierten Regi-on aufweist. Stromaufwärts des Polyadenylierungssignals befindet sich ein Sequenzelement (USE), welches die 3´Endprozessierung sequenz- und positionsanhängig stimuliert. Dabei fungieren interessanterweise einige Spleißfaktoren (hnRNPI, U2AF35 und U2AF65) als posi-tive F2 USE-Effektorproteine, indem sie den kanonischen 3´Endprozessierungsapparat an die prä-mRNA rekrutieren. Des Weiteren wurden AU-reiche elementbindende Proteine (sog. ARE-BPs) als hochaffine und spezifische F2 USE Interaktionspartner identifiziert, deren po-tentielle Bedeutung in der 3´Endprozessierung bisher nicht beschrieben und analysiert wurde. Ziel dieser Arbeit war es die Ribonukleoprotein (RNP) Komposition exemplarisch an dem F2 USE Motiv unter Stressbedingungen zu analysieren und dessen Einfluss auf die Regulation der 3´Endprozessierung zu untersuchen.  In molekularen Analysen des F2 USE RNP Komplexes konnte gezeigt werden, dass die meis-ten ARE-BPs direkt und spezifisch an das USE Motiv binden. Stress führt zur Hyperphospho-rylierung von einigen der ARE-BPs (FBP2 und FBP3) und reduziert deren Bindungsaffinität zum F2 USE Motiv. Somit scheinen die FBPs als Stresssensoren zu fungieren, wodurch die Komposition des F2 USE RNP Komplexes dynamisch an physiologische Prozesse angepasst werden kann. Diese und weitere im Labor generierten Daten deuten darauf hin, dass FBP2 und FBP3 wahrscheinlich stressabhängig mit den positiven USE-Effektorproteinen um die Bindung an das F2 USE Motiv konkurrieren. Um die Frage zu beantworten, ob die 3´Endprozessierung der F2 mRNA unter Stressbedin-gungen reguliert wird, wurden stabile Reporter-Zelllinien generiert. In Stressexperimenten verhielten sich die stabilen Zellklone sehr heterogen bzgl. der Regulation der 3´Endprozessierung, was möglicherweise mit der zufälligen Integration der Tandemreporter in das Genom zu erklären ist. Trotz dieser Variabilität deuten aber diese in vivo Daten auf eine USE-abhängige Regulation der 3´Endprozessierung hin, was jedoch mit neuen experimentel-len Ansätzen wie zum Beispiel lokusspezifischen, stabil transfizierten Zelllinien zu prüfen ist. Insgesamt zeigt die hier vorgestellte Arbeit, dass die regulierte 3´Endprozessierung eine be-deutende Rolle bei der stressabhängigen Adaptation der Genexpression spielt.  
date: 2010
type: Dissertation
type: info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
type: NonPeerReviewed
format: application/pdf
identifier: https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserverhttps://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/11055/1/ASG_Dissertation.pdf
identifier: DOI:10.11588/heidok.00011055
identifier: urn:nbn:de:bsz:16-opus-110559
identifier:   Gantzert, Anne-Susan  (2010) Stressabhängige Ribonukleoproteinkomplex Formation in der Kontrolle der Prothrombin Genexpression.  [Dissertation]     
relation: https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/11055/
rights: info:eu-repo/semantics/openAccess
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language: ger