%0 Generic
%A Rindte, Kerstin
%D 2010
%F heidok:11443
%K Maus-Modell
%R 10.11588/heidok.00011443
%T Identifizierung von dynamischen Strukturen während der Leberphase von Plasmodium
%U https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/11443/
%X Die Etablierung einer Infektion mit dem Malaria Parasiten Plasmodium findet in der Leber statt. Während dieser essentiellen aber klinisch stillen Entwicklung bildet Plasmodium Tausende von pathogenen Merozoiten aus einem einzigen invadierten Sporozoiten. In dieser Arbeit wurde die parasitophore Vakuolenmembran (PVM), die Pathogen/Wirts-Schnittstelle, durch die Generation eines Fusionsproteins von den Leberstadienspezifischen Proteinen UIS3 und UIS4 und des fluoreszenten mCherry Proteins visualisiert. UIS3 und UIS4 sitzen in der Membran der parasitophoren Vakuole, die eine Parasiten geschaffene Replikationsnische darstellt. Mit verschiedenen live cell imaging Analysen konnten bisher unbekannte dynamische Veränderungen in der PV enthüllt werden. In dieser Phase entwickelt sich der Parasit von intrazellularer Transformation über eine Wachstumsphase zu der Bildung der pathogenen Merozoiten. Nach dem Beginn der Parasiten Replikation ist die PV in der frühen Leberstadien-Entwicklung eine hoch-dynamische Struktur, die dicke Ausläufer Strukturen in das Wirtszellzytoplasma ausbildet und Vesikel-artige Strukturen sekretiert. Teilweise werden dünne Ausläufer ausgebildet, die weit ins Wirtszellzytoplasma hineinragen und hohe Geschwindigkeiten erreichen die für eine aktive Bewegung sprechen. Diese Ausläufer nehmen Kontakt mit dem Golgi-Apparat der Wirtszelle auf und spielen möglicherweise eine vitale Rolle bei der intrazellulären Parasiten Reifung. Durch subzellulare Auflösung mit Hilfe der Korrelations-Mikroskopie konnten die verschiedenen Ausläufer-Strukturen bestätigt werden und die dünnen Ausläufer als durchgängige membranöse Schläuche beschrieben werden. Während der späten Leberstadien-Entwicklung konnte die PV als statische Struktur beschrieben werden, die keine Strukturen ins Wirtszytoplasma ausbildet. Der Vergleich der Bildung der PV und der PVM-Ausläufer in verschiedenen Wirtszellen ergab deutliche Unterschiede je nach Eignung der Zelle für eine Plasmodium Entwicklung. Die Visualisierung der PVM in Mutanten mit einem Defekt in der Leberstadien-Entwicklung konnte ebenfalls mit den oben beschriebenen Fusionsproteinen durchgeführt werden. Dabei konnte gezeigt werden, dass die PVM sowie PVM-Ausläufer in der uis3(-) Mutante vergleichbar zu WT ausgebildet werden konnte. Dagegen liegt ein Defekt dieser Ausbildung in p36p(-)/p36(-) Parasiten vor.