<> "The repository administrator has not yet configured an RDF license."^^ . <> . . "Untersuchungen der Dynamik von Nukleosomen mittels Einzelmolekülfluoreszenz"^^ . "DNA ist der Speicher der genetischen Information. In Eukaryoten ist die DNA in Nukleosomen organisiert, d.h. kurze DNA-Abschnitte sind zweimal um einen Kern aus Histonproteinen gewunden. Die Nukleosomen beeinflussen die zelluläre Maschinerie, die die genetischen Informationen abliest. Dass zu jeder Zeit die passende Information auf der DNA zugänglich ist, wird unter anderem durch die Dissoziation und die Assemblierung von Nukleosomen reguliert. In dieser Arbeit wurde eine Methode entwickelt, um diese Prozesse in vitro zu analysieren. Dazu wurden Nukleosomen sowohl an verschiedenen Histonen als auch an der DNA mit Fluorophoren markiert und mit Fluoreszenzkorrelationsspektroskopie (FCS) und Einzelmolekül-Förster-Resonanzenergietransfer (spFRET) in einem konfokalen Mikroskop untersucht. Durch Variation der Ionenstärke wurde dabei die Dissoziation und die Assemblierung der Nukleosomen induziert. Mittels FCS wurde aus Fluktuationen der Fluoreszenzintensität der Diffusionskoeffizient von Nukleosomen ermittelt. Da der Diffusionskoeffizient ein Maß für die Größe und Form eines Moleküls ist, konnte durch dessen Änderung die Dissoziation von Nukleosomen verfolgt werden. So wurde gezeigt, dass der Proteinkern schrittweise von der DNA abdissoziiert und substöchiometrische DNA-Histon-Komplexe als Zwischenprodukte auftreten, in denen die DNA für die zelluläre Maschinerie leichter zugänglich ist. FRET ist ein Prozess, bei dem Energie strahlungslos zwischen zwei Fluorophoren übertragen wird. Aus der Emission der Fluorophore lassen sich deren Abstände in Molekülen untersuchen. In dieser Arbeit wurde Energietransfer in einzelnen durch das Fokusvolumen diffundierenden Nukleosomen gemessen. Im Vergleich zu Messungen an Molekülensembles, bei denen der Interfluorophorabstand über alle Nukleosomen gemittelt wird, konnten so verschiedene Zustände identifiziert werden, die sich im Interfluorophorabstand unterscheiden. Auf diese Art konnte eine bislang unbekannte Nukleosomkonformation nachgewiesen werden, die vor der Dissoziation der Histone von der DNA auftritt, und in der die Histone und die DNA leichter für externe Faktoren zugänglich sind. Auch konnte gezeigt werden, dass bei der Assemblierung von Nukleosomen die gleichen Zwischenprodukte in umgekehrter Reihenfolge durchlaufen werden, und der Prozess vollständig reversibel ist. In vivo wird die Stabilität der Nukleosomen unter anderem durch den Austausch von Histonen durch Histonvarianten reguliert. In dieser Arbeit wurde mit spFRET der Einfluss einer Histonvariante (H2A.Z) untersucht und es wurde gezeigt, dass bei der Dissoziation von Nukleosomen, die diese Histonvariante enthalten, andere Zwischenprodukte auftreten. Die Histonvariante kann daher signifikante Auswirkungen auf die Zugänglichkeit der DNA haben."^^ . "2011" . . . . . . . . "Vera"^^ . "Böhm"^^ . "Vera Böhm"^^ . . . . . . "Untersuchungen der Dynamik von Nukleosomen mittels Einzelmolekülfluoreszenz (PDF)"^^ . . . "Dissertation_VeraBoehm.pdf"^^ . . . "Untersuchungen der Dynamik von Nukleosomen mittels Einzelmolekülfluoreszenz (Other)"^^ . . . . . . "indexcodes.txt"^^ . . . "Untersuchungen der Dynamik von Nukleosomen mittels Einzelmolekülfluoreszenz (Other)"^^ . . . . . . "lightbox.jpg"^^ . . . "Untersuchungen der Dynamik von Nukleosomen mittels Einzelmolekülfluoreszenz (Other)"^^ . . . . . . "preview.jpg"^^ . . . "Untersuchungen der Dynamik von Nukleosomen mittels Einzelmolekülfluoreszenz (Other)"^^ . . . . . . "medium.jpg"^^ . . . "Untersuchungen der Dynamik von Nukleosomen mittels Einzelmolekülfluoreszenz (Other)"^^ . . . . . . "small.jpg"^^ . . "HTML Summary of #12002 \n\nUntersuchungen der Dynamik von Nukleosomen mittels Einzelmolekülfluoreszenz\n\n" . "text/html" . . . "540 Chemie"@de . "540 Chemistry and allied sciences"@en . .