TY - GEN Y1 - 2011/// TI - Entwicklung quantitativer Analysemethoden in der Lokalisationsmikroskopie A1 - Kaufmann, Rainer AV - public UR - https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/12700/ ID - heidok12700 KW - Lokalisationsmikroskopie KW - Her2/Neu KW - Visualisierung von Lokalisationsdaten KW - SPDM KW - Claudin-Proteinelocation microscopy KW - Her2/Neu KW - visualization of localization data KW - SPDM KW - Claudin-Proteine N2 - Um biologische Systeme auf dem Niveau einzelner Proteine und kleiner Proteinkomplexe besser untersuchen und verstehen zu können, ist eine Auflösung weit unterhalb der Grenze der konventionellen Fluoreszenzmikroskopie erforderlich. In den letzten Jahren wurden verschiedene Methoden entwickelt, um die Beugungsgrenze zu überwinden. Eine dieser Methoden stellt die Lokalisationsmikroskopie dar, welche eine Strukturauflösung in Zellen bis in den Bereich von 20 nm ermöglicht. Die vorliegende Arbeit beschreibt neue Methoden für quantitative Analysen basierend auf der Lokalisationsmikroskopie. Neben der erhöhten Strukturauflösung wird hierbei die zusätzliche Information der einzeln detektierten Moleküle genutzt. Die Kombination der Visualisierung von Strukturen im Bereich <100 nm mit statistischen Analysen der Proteinverteilung auf diesen Strukturen eröffnet neue Möglichkeiten biologische und biophysikalische Fragestellungen zu untersuchen. Die im Rahmen der vorliegenden Arbeit entwickelten Algorithmen werden vorgestellt und auf verschiedene aktuelle biologische Fragestellungen angewandt. Hierzu zählen die Analyse der Verteilung von Her2/neu-Proteinen in Brustkrebszellen, eine quantitative Untersuchung von Tight Junction-Netzwerken sowie Distanzanalysen von Splicing-Faktoren im Bezug auf den transkribierten DNA-Strang, um einen tieferen Einblick in die Faltung der mRNA zu erhalten. Außerdem wurde eine detaillierte Untersuchung des Einflusses des Einbettmediums auf die Lokalisationsmessungen mit unterschiedlichen konventionellen Farbstoffen durchgeführt. ER -