TY - GEN AV - public UR - https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/1419/ N2 - p24 Proteine bilden eine konservierten Familie von integralen Membranproteinen mit TypI Topologie. Alle Mitglieder dieser Familie lokalisieren in den Organellen des frühen Sekretionsweges. Aufgrund ihrer Abundanz in COPI und COPII Vesikeln und des Nachweises von spezifischen Interaktionen einiger Mitglieder mit COP-Hüllproteinen, werden p24 Proteine als strukturelle Komponenten der COP Vesikel angesehen. Schwerpunkt der vorliegenden Studie war die funktionelle Analyse dieser Proteine in Säugerzellen. Nach Überexpression eines p24 Proteins mißlokalisierte dieses zusammen mit endogenen Mitgliedern in ER Membranen. Da p24 Proteine heterooligomere Komplexe miteinander bilden und innerhalb des frühen Sekretionsweges zyklisieren, ist die beobachtete Umverteilung sehr wahrscheinlich Folge einer in vivo Interaktion zwischen p24 Proteinen. Diese Interaktion findet vermutlich luminal, in einem Bereich nahe der Transmembrandomäne statt, für den Strukturvorhersagen die Ausbildung von coiled coils annehmen. Die Expression eines p23 Konstruktes mit mutierter zytoplasmatischer Domäne (p23tail*) in HeLa Zellen wirkte toxisch. Dies deutet auf eine essentielle Funktion von p23 in Säugerzellen hin. Darüber hinaus verursachte die Expression von p23tail* eine fast 80ige Transporthemmung des VSV-G Proteins zur Zelloberfläche. Zudem hemmte die Mikroinjektion von Fab-Fragmenten, welche gegen die zytoplasmatischen Domänen von p24 Proteinen gerichtet waren, spezifisch den Transport von VSV-G Protein. Deshalb wird für alle untersuchten p24 Proteine eine Funktion im vorwärtsgerichteten Transport von Membranproteinen postuliert. Die Immunfluoreszenz Analyse des retrograden Transportes von p24 Proteinen vom Golgi zum ER offenbarte die Existenz zweier distinkter Subpopulationen von p24 Proteinen. Die vorgelegten Daten weisen somit erstmalig auf eine funktionelle Auftrennung von p24 Proteinen in vivo hin. A1 - Emig, Eva-Maria ID - heidok1419 Y1 - 2000/// KW - intracellular transport KW - Golgi apparatus KW - Endoplasmic Reticulum KW - microinjection TI - Funktionelle Charakterisierung von Mitgliedern der p24-Proteinfamilie ER -