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datestamp: 2019-07-24 10:29:03
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type: doctoralThesis
metadata_visibility: show
creators_name: Hu, Xiaoying
title: Role of tumor-derived extracellular vesicles in immunosuppression in malignant melanoma patients
subjects: 610
divisions: 61500
adv_faculty: af-06
cterms_swd: Tumor Immunology
cterms_swd: Melanoma
cterms_swd: Extracellular Vesicle
abstract: Das Ziel dieser Studie war es die Rolle von extrazellulären Vesikeln (EVs) bei der Umwandlung von zirkulierenden CD14+ Monozyten in monozytäre myeloide suppressor Zellen (M-MDSCs) zu untersuchen. Dabei wurden EVs aus humanen Melanomzelllinien, sowie Plasma von Melanompatienten isoliert. Wir haben gezeigt, dass EVs von HT-144 Zellen (HT-144 EVs) Bcl-2 in CD14+ Monozyten hochregulierten (auf mRNA -und Proteinebene) und dieses eine anti-apoptotische Wirkung hatten. Darüber hinaus zeigten CD14+ Monozyten ein verstärktes  Entzündungsprofil, sowie eine verstärkte Migration nach der Stimulation mit HT-144 EVs. Nach der Behandlung der Monozyten mit EVs aus HT-144 und SK-MEL-28 Zellen, wurde ein Hochregulation von PD-L1 und eine herunter Regulierung von HLA-DR auf Monozyten beobachtet. Dieser Phänotyp bestätigte die Konvertierung von klassischen Monozyten zu M-MDSCs. Die stimulierten Monozyten zeigten eine starke immunsuppressive Aktivität, da diese die Proliferation von CD8+ T Zellen, sowie deren Produktion von IFN-ү unterdrückten. Die Hochregulation von PD-L1 wurde über den Toll-like-Rezeptor (TLR)2 und TLR4 Signalweg induziert, wobei TLR4 eine dominantere Rolle spielte. Der Signalweg aktivierte NF-κB, was zur Hochregulation von PD-L1 führte. Die Blockade von TLR4 mittels TLR4-blockierenden Antikörpern, sowie NF-κB mit NF-κB Inhibitoren verringerte die PD-L1 Expression signifikant. Des Weiteren fanden wir, dass auf EVs von Melanomzelllinien HSP86 exprimiert wurde. Der Vergleich von HSP86+ EVs mit HSP86low/- EVs verdeutlichte die Bedeutung von der HSP86 vermittelten PD-L1 Expression und der immunsuppressiven Aktivität. Zudem haben wir die Expression von HSP86 in Plasma EVs von Melanompatienten getestet, welche eine Anti-PD-1 Therapie erhielten. Wir haben gezeigt, dass EVs von Nicht-Respondern die PD-L1 Expression hochregulierten und eine immunsuppressive Aktivität in zirkulierenden Monozyten induzierten. Diese EVs zeigten zusätzlich eine deutlich höhere Expression von HSP86 im Vergleich zu EVs von Respondern. Schließlich untersuchten wir PBMCs von 30 Melanompatienten vor und nach einer Anti-PD-1 Behandlung. Wir fanden eine signifikante Abnahme der PD-L1-Expression in zirkulierenden Monozyten von Respondern im Vergleich zum Status beim Beginn der Therapie. Darüber hinaus zeigten Patienten mit niedrigerer PD-L1 Expression auf zirkulierenden Monozyten besseres progressionsfreies Überleben. Zusammengefasst demonstrieren unsere Ergebnisse eine bedeutende Rolle von Tumor-EVs bei der Umwandlung von zirkulierender Monozyten in M-MDSCs. Des Weiteren konnten wir zeigen, dass die PD-L1 Expression auf Monozyten bei Melanompatienten, welche sich einer Anti-PD-1 Therapie unterziehen, eine entscheidende Rolle bei der Vorhersage des Therapieerfolgs hat.
date: 2019
id_scheme: DOI
id_number: 10.11588/heidok.00026776
ppn_swb: 1671664418
own_urn: urn:nbn:de:bsz:16-heidok-267764
date_accepted: 2019-06-14
advisor: HASH(0x5561209cbb30)
language: eng
bibsort: HUXIAOYINGROLEOFTUMO2019
full_text_status: public
place_of_pub: Heidelberg
citation:   Hu, Xiaoying  (2019) Role of tumor-derived extracellular vesicles in immunosuppression in malignant melanoma patients.  [Dissertation]     
document_url: https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/26776/3/Dissertation_Xiaoying_Hu.pdf