title: Funktionelle Charakterisierung von Myosin IK in Dictyostelium discoideum
creator: Kistler, Claudia
subject: 570
subject: 570 Life sciences
description:  Die hochbewegliche Amöbe D. discoideum exprimiert 12 verschiedene Myosinisoformen, von denen sieben der Klasse I angehören. Myosin IK, ein Mitglied dieser Klasse, hat eine einzigartige Struktur. Es zeichnet sich durch eine überdimensionale Motordomäne und sehr kurzen Halsregion aus. Die Schwanzdomäne fehlt offensichtlich ganz.  In vivo Studien von endogenem MyoK zeigten, daß in den mobilen Phasen ca. 10 des Proteins an Membranen assoziiert. Immunfluoreszenzen bestätigten eine Assoziation von MyoK nur an bestimmten Regionen der Plasmamembran. Innerhalb der Motordomäne in der Region der Oberflächenschleife 1 (Loop 1) befindet sich eine Insertion (GPR-Loop). Diese enthält einen hohen Anteil an Prolin (P), Glycin (G) und Arginin (R) und weist Homologie zu einer ATP-unabhängigen actinbindenden Domäne auf, die im Schwanz anderer Myosine I zu finden ist. Trotz dieser Insertion verhält sich MyoK wie ein klassisches Myosin, indem es in ATP-abhängiger Weise an F-Actin bindet. Doch ist die Freisetzung von Actin nicht nur ATP-, sondern auch salzabhängig. Der in E. coli exprimierte GPR-Loop zeigte eine salzabhängige Actinbindung in vitro.  Der GPR-Loop enthält poly-Prolin Motive (ZPPX) und ein SH3 Motiv. Zur Untersuchung einer Bindung an weitere Proteine wurden Interaktionsstudien des GST-GPR-Loops mit zellulären Extrakten durchgeführt. Die gefundene in vivo Assoziation zwischen GPR-Loop und Profilactin wurde in vitro direkt als Bindung über Profilin bestätigt. Die Ansequenzierung weiterer Liganden führte zu der Identifizierung von D. discoideum Abp1, einem actinbindenden Protein, das bisher nur in S. cerevisiae und M. musculus beschrieben ist. Damit eröffnete sich eine neue Sicht bezüglich der Funktion von MyoK. Abp1 gilt als Aktivator des Arp2/3 Komplex, durch den beschleunigte Actinnukleation stattfindet. So scheint MyoK nicht nur eine mechanische Rolle innerhalb des Actincortex zu spielen, sondern kann als Regulator die Actin-Polymerisation aktiv beeinflussen.  
date: 2002
type: Dissertation
type: info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
type: NonPeerReviewed
format: application/pdf
identifier: https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserverhttps://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/2979/1/Diss_CK.pdf
identifier: DOI:10.11588/heidok.00002979
identifier: urn:nbn:de:bsz:16-opus-29793
identifier:   Kistler, Claudia  (2002) Funktionelle Charakterisierung von Myosin IK in Dictyostelium discoideum.  [Dissertation]     
relation: https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/2979/
rights: info:eu-repo/semantics/openAccess
rights: http://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/help/license_urhg.html
language: ger