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datestamp: 2021-07-06 10:25:57
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status_changed: 2021-07-06 10:25:57
type: doctoralThesis
metadata_visibility: show
creators_name: Weber, Michael
title: MINSTED Fluorescence Nanoscopy
subjects: ddc-530
divisions: i-130001
adv_faculty: af-13
abstract: Eine neue Nanoskopie Methode, MINSTED, wurde entwickelt, welche fluoreszierende Emit-
ter durch STED bis in den einstelligen Nanometerbereich genau lokalisiert und dies mit
einer minimalen Anzahl an detektierten Photonen erreicht. Organische Fluorophore wurden
synthetisiert und getestet, um die Anforderungen der MINSTED-Mikroskopie zu erfüllen.
Zunächst wurden photoschaltbare Diarylethene durch die Verringerung ihrer Ringöffnungs-
Quantenausbeute und eine Verbesserung ihrer Wasserlöslichkeit optimiert. Unerwünschte
photochemische Reaktionen über höhere angeregte Zustände durch STED-Licht verhin-
derten aber ihren Einsatz in der MINSTED Nanoskopie. Das photoaktivierbare Silizium-
rhodamin ONB-2SIR wurde auf hohe Resilienz gegenüber Zweiphotonenaktivierung durch
den STED-Laser hin optimiert und ein spezielles Konjugations- und Aufreinigungsprotokoll
wurde entwickelt, um seine schlechte Wasserlöslichkeit zu umgehen. Auf immobilisierten Einzelemittern wurde durch MINSTED eine Lokalisationsgenauigkeit von 2 nm mit nur
200 detektierten Photonen erreicht. Primäre Antikörper gekoppelt mit ONB-2SIR auf
zellulären Proben führten zu einer Lokalisationspräzision der Fluorophore von 2.1 nm im
Median.
date: 2021
id_scheme: DOI
id_number: 10.11588/heidok.00030194
ppn_swb: 1762008319
own_urn: urn:nbn:de:bsz:16-heidok-301945
date_accepted: 2021-06-16
advisor: HASH(0x55d997ba28d8)
language: eng
bibsort: WEBERMICHAMINSTEDFLU2021
full_text_status: public
place_of_pub: Heidelberg
citation:   Weber, Michael  (2021) MINSTED Fluorescence Nanoscopy.  [Dissertation]     
document_url: https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/30194/1/Dissertation.pdf