TY - GEN ID - heidok5216 UR - https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/5216/ Y1 - 2004/// TI - Anwendung von Weitfeldmikroskopie mit strukturierter Beleuchtung für funktionelle Hirnabbildung AV - public A1 - Janke, Ingo N2 - Der Vorteil der Weitfeldmikroskopie bei der funktionellen Hirnabbildung gegenüber der oft angewendeten Laserscanningmikroskopie ist, daß sie eine parallele Aufnahme an vielen Stellen mit hoher Geschwindigkeit erlaubt. Dabei ist jedoch eine Tiefendiskrimination der Signale nur sehr eingeschränkt möglich. In dieser Arbeit wird erstmals untersucht, wie die Methode der strukturierten Beleuchtung, mit der optische Schnittbildung in die Weitfeldmikroskopie eingeführt wird, für die funktionelle Hirnabbildung eingesetzt werden kann. Es mußte eine andere Art der Gitterbewegung für Aufnahmen mit hoher Geschwindigkeit und ein neuer Algorithmus zur Gewinnung schneller und schwacher Infokussignale entwickelt werden. Damit konnten in vitro funktionelle Signale gemessen und es konnte in vivo gezeigt werden, wie Außerfokuslicht die Intensität von Infokusstrukturen im konventionellen Weitfeldbild als umgekehrt erscheinen lassen kann. Es zeigte sich, daß das Signal-zu-Rausch Verhältnis im Vergleich zum konventionellen Weitfeldmikroskop durch Licht reduziert wird, das vor der Anwendung des Schnittbildungsalgorithmus auch von außerhalb der optischen Schnittdicke detektiert wird. Daher ist eine dem Laserscanningmikroskop vergleichbare Schnittdicke nicht sinnvoll, es wurde eine Schnittdicke von 90 Mikrometern realisiert, die ungefähr der Breite einer Hirnschicht einer Maus entspricht. Als zweiter maßgeblicher Faktor für das Signal-zu-Rausch Verhältnis erwies sich die Streuung im Gehirn, die die Infokusmodulation abschwächt. Deren Einfluß kann durch eine größere Anregungswellenlänge und breitere Gitterstreifen reduziert werden, ohne die Schnittdicke stark zu verbreitern. KW - Optische Schnittbildung KW - Strukturierte Beleuchtungoptical sectioning KW - structured illumination KW - functional brain imaging ER -