title: Präklinische Evaluation einer Vakzinierungsstrategie gegen HIV-1 basierend auf konformationellen Epitopen des Env-Glykoproteins
creator: Pisch, Thorsten
subject: ddc-570
subject: 570 Life sciences
description: Das zentrale Ziel der vorliegenden Arbeit war die Untersuchung einer durch ein potentielles HIV-Vakzin induzierten Immunantwort, welches auf konformationellen Env-Epitopen basiert, die durch die Interaktion mit dem zellulären Rezeptorkomplex (CD4/CXCR-4) induziert werden. In unserer Arbeitsgruppe wurde bereits gezeigt, dass Pseudovirionen (PV) mit eingebauten HIV-Env- bzw. CD4/CXCR-4-Molekülen eine Env-vermittelte Fusion miteinander eingehen können. In dieser Arbeit wurde ein Env- und CD4/CXCR-4-PV-Gemisch in einer Zwischenphase der Fusion fixiert, während derer induzierte Env-Epitope exponiert werden, und die induzierte Immunantwort nach Immunisierungen von Versuchstieren mit diesem PV-Vakzin analysiert. Am Anfang dieser Arbeit wurden Versuche zur Charakterisierung und Verbesserung der Zusammensetzung und Eigenschaften der für das PV-Vakzin verwendeten Pseudovirionen durchgeführt. Wesentliche Verbesserungen wurden hinsichtlich der Effizienz der PV-Herstellung und bezüglich der PV-Reinheit erzielt.  Zahlreiche Immunisierungsexperimente in nicht transgenen Mäusen zeigten, dass die Immunisierung mit Pseudovirionen allein keine starke Immunantwort induziert, und dass eine prime-Immunisierung mit rekombinanten Env-Proteinen notwendig ist, um das Immunsystem effizient auf die geringen Mengen konformationell relevanter Env-Moleküle im PV-Vakzin zu lenken. Neben der Induktion von Env-Antikörpern in den Seren erlaubte das veränderte Protokoll auch die Generierung Env-spezifischer monoklonaler Antikörper (Mabs). Da das PV-Vakzin auch CD4 und CXCR-4 enthielt, wurden weitere Immunisierungen in dagegen toleranten huCD4/huCXCR-4 transgenen Ratten durchgeführt. In einem initialen Immunisierungsexperiment wurden durch das PV-Vakzin neutralisierende Antikörper im Serum induziert und außerdem ein Env-spezifischer monoklonaler Antikörper (R I.23 B/3) generiert, der ein heterologes HIV 1 Primärisolat (J27) neutralisieren kann. Unseres Wissens ist dies der erste nach Vakzinierungen in Versuchstieren hergestellte Mab, der ein heterologes HIV-1 Primärisolat neutralisieren kann. Obwohl die Serumantikörper der vakzinierten Ratte kein Vermögen zur Kreuzneutralisation zeigten, war der Titer gegen homologes Virus höher als in den Seren der Ratten, die mit großen Mengen an rekombinanten Env-Proteinen geboostet wurden. Außerdem zeigte das Tier, welches dieselbe Menge an Env-PV wie im PV-Vakzin erhalten hatte (allerdings ohne ein Mischen mit CD4/CXCR-4-PV), keine neutralisierende Immunantwort. Dies bedeutet möglicherweise, dass konformationelle Epitope des PV-Vakzins für die Induktion der neutralisierenden Immunantwort verantwortlich sind und die geringen Mengen der darin enthaltenen Env-Proteine kompensieren. Diese Immunantworten wecken die Hoffnung, dass Optimierungen des PV-Vakzins, insbesondere die Erhöhung des Env-Einbaus in PV, zur Induktion einer qualitativ besseren Immunantwort führen und somit die Grundlage für weitere Forschungsansätze zur Anwendung im Menschen darstellen könnten.
date: 2005
type: Dissertation
type: info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
type: NonPeerReviewed
format: application/pdf
identifier: https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserverhttps://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/5842/1/Dissertation_Pisch.pdf
identifier: DOI:10.11588/heidok.00005842
identifier: urn:nbn:de:bsz:16-opus-58423
identifier:   Pisch, Thorsten  (2005) Präklinische Evaluation einer Vakzinierungsstrategie gegen HIV-1 basierend auf konformationellen Epitopen des Env-Glykoproteins.  [Dissertation]     
relation: https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/5842/
rights: info:eu-repo/semantics/openAccess
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language: ger