title: Untersuchungen zur Bedeutungder Nukleosid Diphosphat Kinase B für die Expression heterotrimerer G Proteine im Zebrafischembryo
creator: Mehringer, Rebecca Veronica
subject: 570
subject: 570 Life sciences
description: Der Gehalt des Enzyms Nukleosid-Diphosphat-Kinase (NDPK) ist Plasmamembranen aus chronisch insuffizienten Herzen um 300% höher als in Plasmamembranen gesunder Herzen. Außerdem konnte gezeigt werden, dass die NDPK B-Isoform des Enzyms in der Plasmamembran Komplexe mit G-Protein-betagamma-Dimeren (Gbetagamma) bildet, die heterotrimere G-Proteine über eine Phosphattransfer-Reaktion aktivieren können. Unklar ist jedoch, welche Rolle diese Komplexbildung aus NDPK B und Gβgamma für die Funktion des Herzens spielt. In dieser Arbeit wurde deshalb im in-vivo-Modell des Zebrafischembryos die Expression der im Herzen dominanten NDPK-Isoformen, NDPK A und B sowie der human Orthologen der Gbeta1-Untereinheiten, Gbeta1 und Gbeta1like, mittels Morpholino-Injektion ausgeschaltet und die Herzfunktion im Vergleich zu Wildtyp- bzw. kontrollinjizierten Zebrafischembryonen untersucht. Die Abnahme der NDPK- bzw. Gbeta1-Expression wurde 72 Stunden nach Morpholino-Injektion im Immunoblot und NDPK-Aktivitäts-Assay nachgewiesen. Die Depletion der NDPK B, nicht aber der Isoform A, verursachte einen kardialen Phänotyp, der durch eine deutlich verminderte Pumpfunktion, verminderten Blutfluss und einen Defekt in der Gefäßbildung gekennzeichnet war. Dabei zeigten histologische Färbungen und Immunhistologie eine strukturell intakte Entwicklung des Herzens. Als Folge des Knockdowns der NDPK B konnte eine deutliche Reduktion der Expression der Gbeta1- und Ggamma2-Untereinheiten, sowie der alpha-Untereinheiten von Gs-, Gi-, Gq- und G12-Proteinen beobachtet werden. Der Gehalt an mRNAs, die für die untersuchten Proteine kodieren, war dagegen unbeeinflusst. Der Morpholino-induzierte Knockdown der Gbeta-Untereinheiten Gbeta1 und Gbeta1like zeigte einen ähnlichen hypokontraktilen Phänotyp. Wie beim NDPK B-Knockdown konnte ein Verlust von Galphas, Galphai, Galphaq, Galpha12, Ggamma2 sowie der NDPK B beobachtet werden. Die Daten dieser Arbeit belegen deshalb erstmalig die essentielle Rolle des NDPK B/Gbetagamma-Komplexes für eine normale Kontraktilität des Herzens in vivo. Der erhöhte Plasmamembrangehalt an NDPK im chronisch insuffizienten Herzen könnte deshalb von erheblicher physiologischer Bedeutung sein. 
date: 2008
type: Dissertation
type: info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
type: NonPeerReviewed
format: application/pdf
identifier: https://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserverhttps://archiv.ub.uni-heidelberg.de/volltextserver/8535/1/DissertationRm.pdf
identifier: DOI:10.11588/heidok.00008535
identifier: urn:nbn:de:bsz:16-opus-85357
identifier:   Mehringer, Rebecca Veronica  (2008) Untersuchungen zur Bedeutungder Nukleosid Diphosphat Kinase B für die Expression heterotrimerer G Proteine im Zebrafischembryo.  [Dissertation]     
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language: ger